Mucin 20 Plasmide Double Nickase (h): sc-415003-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Mucin 20 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Mucin 20 Double Nickase Plasmid (h) e il Mucin 20 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira MUC20. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Mucin 20 Plasmide Double Nickase (h) | sc-415003-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Mucin 20 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-415003-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MUC20 codifica la mucina 20, una mucina associata alla membrana espressa sulle superfici epiteliali, dove contribuisce alla struttura del glicocalice e alla modulazione delle interazioni cellula–cellula e cellula–matrice. La mucina 20 è stata implicata nella regolazione della segnalazione mediata da recettori tirosin-chinasici, inclusa la modulazione dell’output della via MET/HGF, influenzando la dinamica a valle delle vie MAPK/ERK e PI3K/AKT. Attraverso i suoi effetti su adesione, migrazione e fenotipi associati alla barriera, MUC20 è rilevante per studi sulla differenziazione epiteliale e sul rimodellamento tissutale. Alterazioni dell’espressione di MUC20 sono state riportate in molteplici contesti patologici, sostenendone l’utilità come strumento molecolare per interrogare il ricollegamento delle reti di segnalazione e la patobiologia epiteliale in modelli sperimentali.
Mucin 20 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus MUC20 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di MUC20. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di MUC20. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con MUC20 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.