Msx-1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-405732

Panoramica

MSX1 codifica il fattore di trascrizione homeobox Msx-1, un regolatore della strutturazione embrionale e dell’impegno di linea cellulare che contribuisce a coordinare le interazioni epitelio–mesenchimali durante lo sviluppo craniofacciale, degli arti e odontogenico. Msx-1 integra segnali di sviluppo, inclusi programmi trascrizionali associati a BMP e WNT, per modulare proliferazione, differenziamento e apoptosi nelle popolazioni di cellule progenitrici. Un’espressione deregolata di MSX1 o varianti con perdita di funzione sono state collegate ad anomalie congenite dello sviluppo craniofacciale e dentale, a conferma del suo ruolo nella morfogenesi e nella specificazione dei tessuti. In contesti adulti, un’attività alterata di MSX1 è inoltre studiata per il suo impatto sulla plasticità cellulare e sullo stato di differenziamento in modelli di biologia dello sviluppo e del cancro.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Msx-1 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene MSX1 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del MSX1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto MSX1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Msx-1.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di MSX1 per lo studio della segnalazione di Msx-1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni MSX1 critici per la funzione di Msx-1
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di MSX1 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal Msx-1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal Msx-1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus MSX1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal Msx-1 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR Msx-1 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia MSX1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio MSX1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.