Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Mox1 Plasmide Double Nickase (m): sc-433531-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Mox1 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Mox1 Double Nickase Plasmid (m) e il Mox1 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Nox1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Mox1 Antibody (C-10): sc-518023
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Mox1 Plasmide Double Nickase (m) | sc-433531-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Mox1 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-433531-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino Nox1 codifica l’isoforma NOX1 della NADPH ossidasi (nota anche come Mox1), un enzima associato alla membrana che genera specie reattive dell’ossigeno (ROS) e modula la segnalazione dipendente dallo stato redox. Gli ossidanti derivati da NOX1 regolano vie associate a proliferazione, migrazione, rimodellamento del citoscheletro e programmi trascrizionali infiammatori, inclusi i pathway MAPK e NF-κB, con effetti sulla biologia delle cellule epiteliali e vascolari. Nei modelli sperimentali, l’alterata attività di NOX1 è spesso collegata a fenotipi di stress ossidativo e a cambiamenti nelle funzioni di difesa dell’ospite e di barriera. Queste proprietà rendono Nox1 un bersaglio utile per analizzare la trasduzione del segnale regolata dai ROS e il controllo redox dell’espressione genica.
Mox1 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Nox1 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Nox1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Nox1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Nox1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.