Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Mox1 Plasmide Double Nickase (h): sc-400951-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Mox1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Mox1 Double Nickase Plasmid (h) e il Mox1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira NOX1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Mox1 Antibody (C-10): sc-518023
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Mox1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-400951-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Mox1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400951-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene umano NOX1 codifica Mox1, una subunità catalitica della NADPH ossidasi che trasferisce elettroni dal NADPH all’ossigeno molecolare per generare superossido e, a valle, specie reattive dell’ossigeno. La segnalazione redox derivata da NOX1 modula l’attività delle vie MAPK e NF-κB, regola la proliferazione delle cellule epiteliali e della muscolatura liscia e influenza la dinamica del citoscheletro e la funzione di barriera. Attraverso nodi di segnalazione sensibili all’ossidazione, Mox1 contribuisce alle risposte infiammatorie, alle interazioni ospite–microbo sulle superfici mucosali e ai programmi di rimodellamento legati alla biologia vascolare e gastrointestinale. Un’attività di NOX1 deregolata e uno squilibrio redox sono stati associati a fenotipi di stress ossidativo rilevanti per l’infiammazione cronica, il rimodellamento cardiovascolare e contesti di segnalazione associati ai tumori.
Mox1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus NOX1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di NOX1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di NOX1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con NOX1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.