Morc3 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-404099

Panoramica

MORC3 (Morc3) codifica un’ATPasi nucleare della famiglia MORC che si associa alla cromatina e contribuisce alla regolazione, dipendente dall’ATP, dell’organizzazione del genoma. È stata implicata nel controllo della trascrizione, nel mantenimento degli stati di eterocromatina e nei processi di risposta al danno al DNA attraverso interazioni con complessi proteici associati alla cromatina. L’attività di MORC3 è collegata alla regolazione dell’architettura nucleare e dei programmi genici responsivi allo stress, rendendola rilevante per studi sulla stabilità epigenetica e sulla segnalazione dell’immunità innata. Una funzione disregolata di MORC3 e la reattività di autoanticorpi sono state riportate in contesti autoimmuni, a supporto dell’indagine sul suo ruolo in fenotipi cellulari associati all’infiammazione.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Morc3 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene MORC3 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del MORC3 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto MORC3 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Morc3.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di MORC3 per lo studio della segnalazione di Morc3, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni MORC3 critici per la funzione di Morc3
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di MORC3 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal Morc3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal Morc3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus MORC3. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal Morc3 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR Morc3 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia MORC3 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio MORC3 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.