MOAP1 Plasmide Double Nickase (h): sc-408271-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- MOAP1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il MOAP1 Double Nickase Plasmid (h) e il MOAP1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira MOAP1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: MOAP1 Antibody (A-11): sc-271338
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
MOAP1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-408271-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MOAP1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-408271-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MOAP1 (modulator of apoptosis 1) codifica una proteina associata alla membrana esterna dei mitocondri che agisce da regolatore pro-apoptotico, collegando i segnali di stress a monte all’attivazione di BAX e alla permeabilizzazione della membrana mitocondriale esterna. Attraverso interazioni con fattori quali RASSF1A e BAX, MOAP1 influenza l’apoptosi intrinseca, l’attivazione delle caspasi e la dinamica mitocondriale, mettendo in relazione le decisioni sul destino cellulare con i danni e le vie di checkpoint. Alterazioni dell’espressione o della regolazione di MOAP1 sono state associate a una ridotta competenza apoptotica, un aspetto rilevante nella biologia dei tumori e nelle risposte cellulari allo stress genotossico. In quanto nodo di connessione tra segnalazione mitocondriale e morte cellulare programmata, MOAP1 è comunemente studiata in modelli di oncogenesi, neurodegenerazione e citotossicità indotta da stress.
MOAP1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus MOAP1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di MOAP1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di MOAP1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con MOAP1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.