MMP2 Plasmide Double Nickase (m): sc-421674-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- MMP2 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il MMP2 Double Nickase Plasmid (m) e il MMP2 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Mmp2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: MMP2 Antibody (2C1): sc-13594
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
MMP2 Plasmide Double Nickase (m) | sc-421674-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MMP2 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-421674-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino **Mmp2** codifica la metalloproteinasi della matrice-2 (MMP2), un’endopeptidasi secreta zinco-dipendente che degrada la membrana basale e componenti della matrice extracellulare interstiziale, come il collagene di tipo IV e la gelatina. L’attività di MMP2 è regolata tramite secrezione come zimogeno e successiva attivazione sulla superficie cellulare in coordinamento con MT1-MMP (MMP14) e TIMP2, collegandola alla proteolisi pericellulare, alla migrazione cellulare e al rimodellamento tissutale. Attraverso il turnover della matrice extracellulare, MMP2 interseca la segnalazione delle integrine, i programmi di transizione epitelio-mesenchimale e le vie di rimodellamento infiammatorio. Una disregolazione di MMP2 è stata associata a rimodellamento fibrotico, alterazioni della matrice vascolare e cardiaca e fenotipi invasivi in modelli oncologici, rendendola un bersaglio comune per studi meccanicistici in sistemi murini.
MMP2 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Mmp2 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Mmp2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Mmp2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Mmp2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.