MIZIP Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-426433

Panoramica

Zmynd19 codifica MIZIP, una proteina associata a dita di zinco e interagente con MYC, implicata nella regolazione di programmi trascrizionali legati alla crescita e alla differenziazione cellulare. Attraverso la sua associazione con MYC e con presunti complessi proteici mediati da dita di zinco, si ritiene che MIZIP influenzi reti di espressione genica che coordinano proliferazione, metabolismo cellulare e specificazione di linea. Un controllo trascrizionale alterato incentrato su MYC è ampiamente rilevante per fenotipi oncogenici e dello sviluppo, rendendo Zmynd19 un nodo utile per analizzare la regolazione trascrizionale dipendente dal contesto. Nei sistemi murini, la perturbazione di MIZIP può contribuire a chiarire come i co-regolatori plasmino le vie guidate da MYC e gli stati cellulari a valle.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO MIZIP (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Zmynd19 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Zmynd19 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Zmynd19 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina MIZIP.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Zmynd19 per lo studio della segnalazione di MIZIP, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Zmynd19 critici per la funzione di MIZIP
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Zmynd19 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal MIZIP CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal MIZIP CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Zmynd19. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal MIZIP Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR MIZIP (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Zmynd19 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Zmynd19 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.