Mig12 Plasmide Double Nickase (h): sc-412921-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Mig12 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Mig12 Double Nickase Plasmid (h) e il Mig12 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira MID1IP1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Mig12 Plasmide Double Nickase (h) | sc-412921-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Mig12 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-412921-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MID1IP1 codifica Mig12, un regolatore citosolico del metabolismo lipidico che interagisce con l’acetil‑CoA carbossilasi (ACC) per modulare la produzione di malonil‑CoA e la sintesi de novo degli acidi grassi. Influenzando l’attività di ACC, Mig12 partecipa a programmi metabolici che incidono sulla biogenesi delle membrane, sull’accumulo di energia e sulla segnalazione sensibile ai nutrienti collegata alla lipogenesi. Un’alterata espressione di MID1IP1 è stata associata al rimodellamento metabolico osservato in obesità, insulino‑resistenza e stati di stress cellulare indotti dai lipidi, rendendolo rilevante per studi sulla biologia delle malattie metaboliche. Questo bersaglio è inoltre di interesse nei sistemi in cui il flusso lipogenico sostiene proliferazione e sopravvivenza, consentendo un’analisi meccanicistica delle vulnerabilità metaboliche.
Mig12 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus MID1IP1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di MID1IP1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di MID1IP1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con MID1IP1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.