MGAT1 Plasmide Double Nickase (m): sc-427040-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- MGAT1 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il MGAT1 Double Nickase Plasmid (m) e il MGAT1 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Mogat1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: MGAT1 Antibody (H-6): sc-376079
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
MGAT1 Plasmide Double Nickase (m) | sc-427040-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MGAT1 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-427040-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino **Mogat1** codifica **MGAT1** (monoacilglicerolo O-aciltransferasi 1), un enzima associato al reticolo endoplasmatico che catalizza la conversione del monoacilglicerolo in diacilglicerolo dipendente da acil-CoA, fornendo substrato per la sintesi dei triacilgliceroli. Regolando la disponibilità di diacilglicerolo, MGAT1 collega i programmi di accumulo lipidico ai processi di segnalazione influenzati dal DAG, intersecando vie che determinano la composizione lipidica delle membrane e le risposte allo stress metabolico. L’espressione di Mogat1 è marcata nei tessuti metabolici ed è spesso studiata in contesti di eccesso di nutrienti, accumulo lipidico epatico e alterata sensibilità all’insulina, in cui cambiamenti nella sintesi dei lipidi neutri possono rimodellare l’omeostasi cellulare. Queste caratteristiche rendono MGAT1 un bersaglio rilevante per studi meccanicistici sul metabolismo lipidico, il bilancio energetico e gli adattamenti trascrizionali a valle in modelli murini.
MGAT1 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Mogat1 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Mogat1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Mogat1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Mogat1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.