Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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MetRS Plasmide Double Nickase (h): sc-402763-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- MetRS Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il MetRS Double Nickase Plasmid (h) e il MetRS Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira MARS. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: MetRS Antibody (H-1): sc-166850
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
MetRS Plasmide Double Nickase (h) | sc-402763-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MetRS Plasmide Double Nickase (h2) | sc-402763-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene umano **MARS** codifica la metionil‑tRNA sintetasi (MetRS), una aminoacil‑tRNA sintetasi citosolica che carica il tRNA^Met con metionina per avviare e sostenere la sintesi proteica. MetRS opera al centro del controllo della traduzione e sostiene la proteostasi cellulare, collegando la disponibilità di nutrienti e le risposte allo stress alla traduzione globale degli mRNA. Come parte del complesso multi‑aminoacil‑tRNA sintetasi, MetRS contribuisce alla regolazione coordinata della traduzione e di processi di segnalazione che influenzano proliferazione e differenziamento. La disregolazione dell’espressione di MARS o dell’attività di MetRS è stata associata a una capacità di traduzione alterata osservata in contesti di cancro e di malattie del neurosviluppo e neurodegenerative, rendendolo rilevante per studi meccanicistici sul mantenimento del proteoma.
MetRS Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus MARS nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di MARS. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di MARS. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con MARS interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.