MC2-R Plasmide Double Nickase (h): sc-402854-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- MC2-R Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il MC2-R Double Nickase Plasmid (h) e il MC2-R Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira MC2R. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
MC2-R Plasmide Double Nickase (h) | sc-402854-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MC2-R Plasmide Double Nickase (h2) | sc-402854-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MC2R codifica il recettore della melanocortina 2 (MC2-R), un recettore accoppiato a proteine G che viene attivato selettivamente dall’ormone adrenocorticotropo (ACTH) per stimolare la segnalazione Gs/cAMP/PKA nelle cellule della corticale surrenalica. Questa via regola l’espressione di geni steroideogenici, inclusi enzimi chiave che controllano la biosintesi dei glucocorticoidi e, più in generale, le risposte allo stress del surrene. La funzione di MC2-R è coordinata con fattori accessori come MRAP, che supportano il traffico del recettore e la responsività all’ACTH, collegando la segnalazione di membrana al controllo trascrizionale della steroidogenesi. Alterazioni genetiche o funzionali di MC2R sono associate a una compromissione della segnalazione mediata da ACTH e a disturbi della produzione di steroidi surrenalici, rendendolo un bersaglio rilevante per la ricerca sulle vie endocrine e sull’asse dello stress.
MC2-R Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus MC2R nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di MC2R. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di MC2R. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con MC2R interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.