Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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MBNL1 Plasmide Double Nickase (h): sc-402194-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- MBNL1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il MBNL1 Double Nickase Plasmid (h) e il MBNL1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira MBNL1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: MBNL1 Antibody (3A4): sc-47740
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
MBNL1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-402194-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MBNL1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-402194-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MBNL1 (regolatore dello splicing tipo muscleblind 1) codifica una proteina legante l’RNA che riconosce motivi YGCY nei pre-mRNA per controllare lo splicing alternativo, la localizzazione dell’mRNA e la sua stabilità. Coordina programmi di regolazione genica post-trascrizionale importanti per la miogenesi, la differenziazione neuronale e il mantenimento dell’espressione di isoforme specifiche dei tessuti. MBNL1 partecipa a vie di processamento dell’RNA e correlate allo spliceosoma e contribuisce a stabilire transizioni di splicing durante lo sviluppo in numerosi trascritti. La deregolazione o il sequestro funzionale di MBNL1 è fortemente associato a firme di splicing aberranti osservate nella distrofia miotonica e in altri fenotipi neuromuscolari, rendendolo un nodo chiave per studi meccanicistici sul misprocessing dell’RNA.
MBNL1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus MBNL1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di MBNL1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di MBNL1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con MBNL1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.