MBL-C Plasmide Double Nickase (h): sc-403131-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- MBL-C Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il MBL-C Double Nickase Plasmid (h) e il MBL-C Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira MBL2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
MBL-C Plasmide Double Nickase (h) | sc-403131-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MBL-C Plasmide Double Nickase (h2) | sc-403131-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MBL2 codifica la lectina legante il mannosio (MBL-C), una molecola solubile di riconoscimento di pattern che avvia la via lectinica del complemento legandosi a motivi carboidratici microbici e attivando le proteasi MASP. Attraverso l’opsonizzazione e l’amplificazione della cascata del complemento, MBL-C contribuisce alla sorveglianza immunitaria innata, alla rimozione di materiale apoptotico e alla modulazione del tono infiammatorio a livello mucosale e sistemico. Le variazioni nell’espressione di MBL2 o nella capacità di oligomerizzazione sono state associate a una suscettibilità alle infezioni alterata e a risposte infiammatorie disregolate, e MBL2 viene spesso studiato come modificatore di fenotipi immunitari in contesti di sepsi, disturbi autoimmuni e malattie infiammatorie croniche. In quanto componente circolante prodotto principalmente dagli epatociti, MBL-C rappresenta inoltre un indicatore facilmente misurabile per studiare mediatori immunitari secreti, la dinamica di attivazione del complemento e le vie di interazione ospite–patogeno.
MBL-C Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus MBL2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di MBL2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di MBL2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con MBL2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.