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MALT1 Plasmide Double Nickase (m) | sc-433761-NIC | 20 µg | $410.00 |
Malt1 codifica MALT1 (paracaspasi), un elemento centrale di scaffold e una proteasi all’interno del signalosoma CARD11–BCL10–MALT1 (CBM), che collega l’attivazione dei recettori dell’antigene all’attivazione della via canonica di NF-κB e delle vie MAPK. Nei linfociti, MALT1 integra i segnali a monte mediati da PKC per promuovere l’attivazione di IKK e programmi trascrizionali che regolano sopravvivenza, proliferazione e produzione di citochine. La sua attività proteasica modula l’ampiezza del segnale scindendo regolatori negativi e plasmando gli output infiammatori. La deregolazione del segnalamento di MALT1 è ampiamente studiata nell’infiammazione immuno-mediata e nella biologia delle neoplasie linfoidi, rendendolo un nodo chiave per studi meccanicistici delle reti di segnalazione immunitaria.
MALT1 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Malt1 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Malt1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Malt1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Malt1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.