MAB21L Plasmide Double Nickase (h): sc-409644-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- MAB21L Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il MAB21L Double Nickase Plasmid (h) e il MAB21L Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira MAB21L1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
MAB21L Plasmide Double Nickase (h) | sc-409644-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MAB21L Plasmide Double Nickase (h2) | sc-409644-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MAB21L1 codifica MAB21L, una proteina nucleare conservata implicata in programmi trascrizionali che coordinano lo sviluppo embrionale e le decisioni di destino cellulare, con particolare rilevanza per la morfogenesi oculare e craniofacciale. Studi funzionali collegano i membri della famiglia MAB21 alla regolazione della differenziazione, della proliferazione e delle vie di patterning guidate da morfogeni, inclusi processi a valle della segnalazione BMP/TGF-β. Nella genetica umana, varianti patogene in MAB21L1 sono associate a malformazioni congenite dell’occhio e a fenotipi di sviluppo sindromici, evidenziandone l’importanza nelle reti regolatorie geniche dello sviluppo. Queste caratteristiche rendono MAB21L1 un bersaglio utile per analizzare, in modelli cellulari, i meccanismi di specificazione di linea e la biologia delle malattie dello sviluppo.
MAB21L Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus MAB21L1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di MAB21L1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di MAB21L1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con MAB21L1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.