Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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LZIP Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-406526
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- LZIP Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico LZIP, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: LZIP Antibody (Q-61): sc-100994
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
LZIP Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-406526 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
CREB3 codifica LZIP, un fattore di trascrizione bZIP (basic leucine zipper) localizzato nel reticolo endoplasmatico, che può essere attivato tramite proteolisi intramembrana regolata per modulare l’espressione genica. LZIP partecipa ai programmi cellulari di adattamento allo stress, integrando lo stress del RE e la segnalazione della risposta alle proteine mal ripiegate (UPR) con il controllo trascrizionale della capacità della via secretoria e dell’omeostasi metabolica. Attraverso interazioni con altri fattori bZIP ed elementi promotori, influenza vie collegate a infiammazione, differenziamento e metabolismo dei lipidi e del glucosio. Un’attività disregolata di CREB3/LZIP è stata associata in letteratura ad alterazioni della segnalazione di stress e a una riprogrammazione trascrizionale osservata in molteplici contesti patologici, a supporto della sua rilevanza per studi meccanicistici.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO LZIP (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene CREB3 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del CREB3 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto CREB3 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina LZIP.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di CREB3 per lo studio della segnalazione di LZIP, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni CREB3 critici per la funzione di LZIP
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di CREB3 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal LZIP CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal LZIP CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus CREB3. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal LZIP Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR LZIP (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia CREB3 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio CREB3 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.