Ly6G5c Plasmide Double Nickase (h): sc-413393-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Ly6G5c Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Ly6G5c Double Nickase Plasmid (h) e il Ly6G5c Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira LY6G5C. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Ly6G5c Plasmide Double Nickase (h) | sc-413393-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Ly6G5c Plasmide Double Nickase (h2) | sc-413393-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LY6G5C codifica Ly6G5c, un membro della superfamiglia Ly6/uPAR di piccole proteine ricche di cisteina, spesso associate a contesti di segnalazione sulla superficie cellulare o secretori. Il gene si trova nella regione MHC di classe III sul cromosoma 6, collegandolo a contesti genomici arricchiti di regolatori immunitari e dell’infiammazione. Sebbene Ly6G5c sia meno caratterizzata rispetto ad altre proteine della famiglia Ly6, i pattern di espressione riportati e il legame con la regione suggeriscono un possibile coinvolgimento nella comunicazione tra cellule immunitarie, nelle interazioni epitelio–immunitarie e nella modulazione delle reti di segnalazione infiammatoria. Le variazioni genetiche e l’espressione disregolata all’interno del locus MHC sono state associate alla suscettibilità a malattie autoimmuni e infiammatorie, rendendo LY6G5C rilevante per studi meccanicistici su fenotipi legati all’immunità.
Ly6G5c Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus LY6G5C nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di LY6G5C. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di LY6G5C. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con LY6G5C interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.