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Lumican双切口酶质粒(h) | sc-402001-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Lumican双切口酶质粒(h2) | sc-402001-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LUM 编码 lumican(角膜蛋白聚糖),这是一种分泌型的小亮氨酸富集蛋白聚糖,属于细胞外基质成分,可与胶原原纤维结合并调控原纤维形成(fibrillogenesis)、组织水合状态以及基质/间质结构。Lumican 通过与整合素的相互作用以及影响基质中生长因子的可及性来调节细胞–基质信号传导,从而影响创伤修复、细胞迁移和机械转导等过程。在人体组织中,LUM 在角膜、皮肤和结缔组织间质中的表达尤为显著,有助于胶原的有序排列以及与透明性相关的基质特性。Lumican 水平失衡及细胞外基质重塑异常与纤维化重塑、炎症性微环境以及与侵袭和转移生态位形成相关的肿瘤–间质相互作用有关。
Lumican 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 LUM 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对LUM内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏LUM的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了LUM基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。