LSm11 Plasmide Double Nickase (m): sc-428300-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- LSm11 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il LSm11 Double Nickase Plasmid (m) e il LSm11 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Lsm11. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
LSm11 Plasmide Double Nickase (m) | sc-428300-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LSm11 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-428300-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Nel topo, **Lsm11** codifica **LSm11**, un componente centrale della piccola ribonucleoproteina nucleare **U7** (snRNP), specializzata nel processamento dell’estremità 3′ dei pre‑mRNA degli istoni dipendenti dalla replicazione. Attraverso la sua partecipazione alla via di processamento dell’RNA degli istoni dipendente da U7, LSm11 contribuisce a garantire la corretta maturazione dei trascritti istonici, collegando la progressione della fase S all’assemblaggio della cromatina e alla stabilità del genoma. Ci si aspetta che l’alterazione della funzione di LSm11 comprometta l’omeostasi dell’mRNA degli istoni, con effetti a valle sulle risposte allo stress da replicazione del DNA e sulla regolazione del ciclo cellulare. Questi processi sono ampiamente rilevanti per fenotipi proliferativi e per studi meccanicistici sul mantenimento della cromatina e dell’integrità genomica in modelli cellulari murini.
LSm11 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Lsm11 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Lsm11. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Lsm11. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Lsm11 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.