Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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LKB1 Plasmide Double Nickase (m): sc-423192-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- LKB1 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il LKB1 Double Nickase Plasmid (m) e il LKB1 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Stk11. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: LKB1 Antibody (Ley 37D/G6): sc-32245
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
LKB1 Plasmide Double Nickase (m) | sc-423192-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LKB1 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-423192-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino **Stk11** codifica la chinasi serina/treonina **LKB1**, un regolatore chiave dell’omeostasi energetica e della polarità cellulare, che attiva **AMPK** e un ampio insieme di chinasi correlate ad AMPK. Attraverso questo asse di segnalazione, LKB1 coordina le risposte allo stress metabolico, la funzione mitocondriale, l’autofagia e il controllo del ciclo cellulare, e contribuisce al mantenimento dell’architettura epiteliale tramite complessi di polarità. L’alterazione delle vie dipendenti da LKB1 è associata a un controllo della crescita compromesso e a una riprogrammazione metabolica, rendendo **Stk11** un nodo centrale negli studi sulla biologia dei geni oncosoppressori. Nei sistemi murini, la perturbazione di LKB1 è ampiamente utilizzata per indagare la regolazione tessuto-specifica del metabolismo, il comportamento delle cellule staminali e l’adattamento allo stress del microambiente.
LKB1 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Stk11 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Stk11. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Stk11. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Stk11 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.