LHX2 Plasmide Double Nickase (h): sc-401071-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- LHX2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il LHX2 Double Nickase Plasmid (h) e il LHX2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira LHX2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: LHX2 Antibody (LHX2A12G1): sc-81311
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
LHX2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-401071-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LHX2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-401071-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LHX2 codifica un fattore di trascrizione LIM-homeobox che regola la specificazione di linea, il mantenimento dei progenitori e la patterning dei tessuti durante lo sviluppo. LHX2 agisce attraverso il legame al DNA e interazioni proteiche mediate dal dominio LIM per coordinare programmi trascrizionali coinvolti nella regolazione della cromatina, nelle decisioni di destino cellulare e nella differenziazione in contesti neurali, oculari ed ematopoietici. Nei tessuti adulti, un’alterata espressione di LHX2 è stata associata a reti geniche dello sviluppo deregolate e a stati anomali di proliferazione o differenziazione. In quanto regolatore dipendente dal contesto, LHX2 è spesso studiato per i suoi ruoli nella biologia delle cellule staminali, nelle vie neuro-sviluppative e nei meccanismi di controllo trascrizionale rilevanti per firme di espressione genica associate a patologie.
LHX2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus LHX2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di LHX2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di LHX2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con LHX2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.