LBP Plasmide Double Nickase (h): sc-402651-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- LBP Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il LBP Double Nickase Plasmid (h) e il LBP Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira LBP. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: LBP Antibody (4E8): sc-293253
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
LBP Plasmide Double Nickase (h) | sc-402651-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LBP Plasmide Double Nickase (h2) | sc-402651-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La proteina legante il lipopolisaccaride (LBP) è una glicoproteina solubile della fase acuta che si lega al lipopolisaccaride batterico e ne facilita il trasferimento a CD14 e al complesso recettoriale TLR4/MD-2, amplificando il riconoscimento immunitario innato dei batteri Gram-negativi. Attraverso questa funzione di presentazione dell’LPS, LBP contribuisce all’attivazione di NF-κB e dei programmi di citochine infiammatorie a valle, che modulano il reclutamento dei leucociti e le risposte infiammatorie sistemiche. L’espressione di LBP è regolata da segnali infiammatori ed è spesso utilizzata come marcatore di esposizione alle endotossine, collegandola agli studi sulle interazioni ospite–microbi e sull’omeostasi immunitaria. Un’attività o un’abbondanza di LBP deregolate sono state associate a fenotipi infiammatori e a fisiopatologia correlata alle infezioni, rendendola rilevante per studi meccanicistici in immunologia e in modelli di infiammazione metabolica.
LBP Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus LBP nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di LBP. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di LBP. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con LBP interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.