Lamin B receptor Plasmide Double Nickase (h): sc-403633-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Lamin B receptor Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Lamin B receptor Double Nickase Plasmid (h) e il Lamin B receptor Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira LBR. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Lamin B receptor Plasmide Double Nickase (h) | sc-403633-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Lamin B receptor Plasmide Double Nickase (h2) | sc-403633-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LBR codifica per il recettore della lamina B, una proteina integrale della membrana nucleare interna che si lega alle lamine di tipo B e a fattori associati all’eterocromatina, contribuendo ad ancorare la cromatina alla lamina nucleare. Attraverso queste interazioni partecipa all’architettura dell’involucro nucleare, al mantenimento dell’eterocromatina periferica e alla regolazione dell’organizzazione del genoma durante l’interfase e l’uscita dalla mitosi. LBR contiene inoltre un dominio simile a una sterolo-reduttasi, collegato a processi del metabolismo lipidico, che mette in relazione la struttura nucleare con l’omeostasi cellulare. Un’alterata funzione di LBR è associata a difetti nella forma del nucleo e nella distribuzione della cromatina, rendendolo rilevante per studi sui disordini dell’involucro nucleare e su meccanismi più ampi di stabilità genomica.
Lamin B receptor Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus LBR nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di LBR. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di LBR. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con LBR interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.