Plásmido Doble Nickase (h) Lamin B receptor: sc-403633-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Lamin B receptor consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Lamin B receptor (h) y el plásmido de doble nickasa Lamin B receptor (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a LBR. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Lamin B receptor | sc-403633-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Lamin B receptor | sc-403633-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LBR codifica el receptor de la lámina B, una proteína integral de la membrana nuclear interna que se une a las láminas de tipo B y a factores asociados a la heterocromatina para ayudar a anclar la cromatina a la lámina nuclear. A través de estas interacciones, contribuye a la arquitectura de la envoltura nuclear, al mantenimiento de la heterocromatina periférica y a la regulación de la organización del genoma durante la interfase y la salida de la mitosis. LBR también contiene un dominio similar a una reductasa de esteroles, vinculado a procesos del metabolismo lipídico, lo que conecta la estructura nuclear con la homeostasis celular. La alteración de la función de LBR se asocia con defectos en la forma del núcleo y en la distribución de la cromatina, lo que lo hace relevante para estudios de trastornos de la envoltura nuclear y de mecanismos más amplios de estabilidad del genoma.
Lamin B receptor El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus LBR en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de LBR. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de LBR. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con LBR alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.