KLHL9 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-406655-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- KLHL9O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase KLHL9 (h) e o Plasmídeo Double Nickase KLHL9 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para KLHL9. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
KLHL9 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-406655-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
KLHL9 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-406655-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KLHL9 codifica uma proteína da família BTB–BACK–Kelch que atua como adaptadora de substratos em complexos de ubiquitina ligase E3 do tipo RING dependentes de Cullin-3 (CUL3), ajudando a conferir especificidade à degradação de proteínas dependente de ubiquitina. Por meio da ubiquitinação regulada, KLHL9 contribui para a proteostase celular e influencia processos ligados à organização do citoesqueleto e à progressão do ciclo celular, incluindo o controlo mitótico. A disrupção de KLHL9 tem sido associada a fenótipos do neurodesenvolvimento e neuromusculares, o que é consistente com a importância de uma sinalização de ubiquitina equilibrada em tecidos excitáveis e de longa duração. Como proteína KLHL humana, é frequentemente estudada em vias que ligam o reconhecimento de substratos por ligases E3 a respostas ao stress e à homeostase celular.
KLHL9 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus KLHL9 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de KLHL9. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função KLHL9. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com KLHL9 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.