KCNQ3 Plasmide Double Nickase (h): sc-403544-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- KCNQ3 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il KCNQ3 Double Nickase Plasmid (h) e il KCNQ3 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira KCNQ3. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
KCNQ3 Plasmide Double Nickase (h) | sc-403544-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
KCNQ3 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-403544-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KCNQ3 codifica la subunità del canale del potassio voltaggio-dipendente Kv7.3, che si assembla con altri membri della famiglia Kv7, in particolare Kv7.2, per formare correnti di K⁺ di tipo M che stabilizzano il potenziale di membrana a riposo e limitano la scarica ripetitiva. Modellando l’eccitabilità sottosoglia e l’adattamento del potenziale d’azione, KCNQ3 contribuisce alle oscillazioni delle reti neuronali e all’integrazione sinaptica nei sistemi nervosi centrale e periferico. L’attività del canale è modulata dal fosfatidilinositolo 4,5-bisfosfato (PIP2) e dalla segnalazione accoppiata a Gq/PLC, collegando la funzione di KCNQ3 al controllo dell’eccitabilità di membrana mediato dai recettori. Alterazioni genetiche e funzionali di KCNQ3 sono state associate a fenotipi neuroevolutivi e correlati alle crisi epilettiche, rendendolo un bersaglio utile per studi meccanicistici sulla regolazione dei canali ionici e sulla segnalazione dipendente dall’eccitabilità.
KCNQ3 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus KCNQ3 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di KCNQ3. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di KCNQ3. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con KCNQ3 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.