KCNQ2 더블 틈내기효소 플라스미드 (h): sc-402492-NIC

KCNQ2는 전압 개폐성 칼륨 채널 소단위를 암호화하며, 신경세포의 M형(Kv7) 전류를 형성하도록 조립되어 안정막전위를 형성하고 활동전위 발화를 조절합니다. KCNQ2는 역치 이하 흥분성과 스파이크 빈도 적응을 조절함으로써, 막전압 역학을 신경전달 및 네트워크 안정성과 연결하는 신호전달 과정에 통합됩니다. KCNQ2 기능 변화는 신경발달 및 뇌전증 관련 표현형과 연관되어 있어, 인간 세포 모델에서 흥분성 및 시냅스 회로 조절 기전을 규명하기 위한 중요한 표적입니다. 연구 응용으로는 이온 채널 생물물리 특성, 신경세포 분화 결과, 그리고 활성 의존적 유전자 발현의 경로 수준 변화 등을 분석하는 데 흔히 사용됩니다.

KCNQ2 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 KCNQ2 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 KCNQ2 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 KCNQ2의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.

편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, KCNQ2 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.