KBTBD6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-409349

Visão geral

KBTBD6 (kelch repeat and BTB domain containing 6) codifica uma proteína da família BTB–BACK–Kelch, prevista para atuar como adaptadora de substratos em complexos de ligase E3 de ubiquitina baseados em CUL3. Por meio da ligação à cullina mediada por BTB e do reconhecimento de substratos dependente de Kelch, a KBTBD6 está posicionada para regular a ubiquitinação e a degradação proteassomal de proteínas que controlam a progressão do ciclo celular, a organização do citoesqueleto e a sinalização responsiva ao estresse. Esses processos de controle de qualidade proteica influenciam vias como a degradação dependente de ubiquitina e programas transcricionais e proliferativos associados. A desregulação de adaptadores de ligases de ubiquitina é frequentemente associada a alterações de proteostase e de estados de sinalização observadas no câncer e em outras doenças, tornando a KBTBD6 relevante para estudos mecanísticos da regulação mediada por ubiquitina.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO KBTBD6 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene KBTBD6 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do KBTBD6, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do KBTBD6 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína KBTBD6.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de KBTBD6 para a investigação da sinalização de KBTBD6, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) KBTBD6 críticos para a função KBTBD6
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos KBTBD6 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo KBTBD6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo KBTBD6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus KBTBD6. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo KBTBD6 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR KBTBD6 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia KBTBD6 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo KBTBD6 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.