JMJD8 Plasmide Double Nickase (h): sc-406662-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- JMJD8 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il JMJD8 Double Nickase Plasmid (h) e il JMJD8 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira JMJD8. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: JMJD8 Antibody (H-4): sc-515520
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
JMJD8 Plasmide Double Nickase (h) | sc-406662-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
JMJD8 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-406662-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
JMJD8 codifica una proteina contenente un dominio JmjC, implicata nella regolazione dell’omeostasi proteica e della segnalazione adattativa allo stress. La JMJD8 umana è stata collegata a processi associati al reticolo endoplasmatico e alla modulazione di vie guidate dai recettori, includendo effetti su ripiegamento/traffico e sugli esiti del controllo qualità che modellano la proteostasi cellulare. Attraverso queste funzioni, JMJD8 può influenzare la proliferazione, la segnalazione infiammatoria e le risposte allo stress metabolico o ossidativo. Un’alterata espressione di JMJD8 o l’alterazione dell’attività delle sue vie è stata riportata in molteplici contesti rilevanti per la malattia, a supporto dell’indagine sul suo ruolo nelle reti di segnalazione oncogeniche e nella regolazione degli stati cellulari.
JMJD8 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus JMJD8 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di JMJD8. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di JMJD8. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con JMJD8 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.