JMJD4 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406639

Übersicht

JMJD4 kodiert eine 2‑Oxoglutarat‑abhängige Oxygenase mit JmjC‑Domäne, die an posttranslationalen Hydroxylierungsreaktionen beteiligt ist und dadurch die Stabilität und Funktion von Proteinen beeinflussen kann. Die Aktivität von JMJD4 wurde mit der Regulation translationsbezogener Prozesse in Verbindung gebracht, unter anderem durch die Modifikation ribosomaler und RNA‑bindender Faktoren, mit nachgeschalteten Effekten auf die Proteostase und zelluläre Stressantworten. Indem JMJD4 Oxygenase‑Chemie mit der Kontrolle der Genexpression verknüpft, wird es in Signalwegen untersucht, die metabolische Sensorik, hypoxieassoziierte Signalübertragung und die adaptive Umgestaltung der Translationsmaschinerie betreffen. Eine Fehlregulation dieser Prozesse ist für proliferative und stressadaptierte Zustände relevant, was JMJD4 zu einem nützlichen Ziel für mechanistische Studien in der Krebsbiologie und verwandten Programmen der Transkriptions‑/Translationskontrolle macht.

Das JMJD4 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des JMJD4-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des JMJD4-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von JMJD4 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die JMJD4-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von JMJD4-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der JMJD4-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf JMJD4-Exone abzielen, die für die JMJD4-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere JMJD4-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom JMJD4 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom JMJD4 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des JMJD4-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das JMJD4 HDR-Plasmid (h) und JMJD4 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von JMJD4-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten JMJD4-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.