Jade-1 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-410620-LAC

JADE1 codifica a Jade-1, uma proteína nuclear com dedo PHD que atua como reguladora da transcrição associada à cromatina, ao reconhecer marcas de histonas e coordenar a acetilação de histonas por meio de interações com complexos HAT, como o HBO1. A Jade-1 participa do controle da progressão do ciclo celular, das respostas a danos no DNA e da diferenciação, modulando a acessibilidade da cromatina e programas de expressão gênica. Ela também foi associada à regulação dependente de ubiquitina de componentes de sinalização, incluindo ligações relatadas à modulação da via Wnt/β-catenina, sustentando papéis no controle do crescimento e na homeostase epitelial. Alterações na expressão ou na função de JADE1 têm sido investigadas na biologia do câncer e na fisiopatologia relacionada aos rins, tornando-o relevante para estudos de regulação epigenética e redes associadas a supressores tumorais.

As Partículas de Ativação Lentivirais Jade-1 (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de JADE1 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais Jade-1 (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição JADE1, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de Jade-1. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo JADE1 e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.