JAB1 Lentiviral Activation Particles (m): sc-424107-LAC

Mouse **Cops5** kodiert **JAB1** (auch **CSN5** genannt), die katalytische Untereinheit des **COP9-Signalosoms**, das den Proteinumsatz steuert, indem es Cullin-RING-Ubiquitin-Ligasen durch **Deneddylierung** reguliert. Durch die Feinabstimmung der ubiquitinabhängigen Degradation beeinflusst JAB1 die Zellzyklusprogression, DNA-Schadensantworten und stressadaptive Transkriptionsprogramme, einschließlich der Modulation der AP-1-Aktivität und von Signalwegen, die mit der Stabilität von CDK-Inhibitoren verknüpft sind. JAB1 ist zudem an Signalprozessen sowie am nukleo-zytoplasmatischen Shuttle beteiligt, die Proliferation und Differenzierung beeinflussen, wodurch es für Modelle von fehlreguliertem Wachstum und entzündungsassoziiertem Gewebeumbau relevant ist. Eine veränderte CSN5/JAB1-Aktivität wurde mit einer Umprogrammierung onkogener Signalwege und Veränderungen der Immun-Signalgebung in Verbindung gebracht, was seinen Nutzen für mechanistische Studien zu Proteostase und Signalweg-Crosstalk unterstreicht.

JAB1 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Cops5-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

JAB1 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Cops5-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen JAB1-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Cops5-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.