ITI-H4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403358

Visão geral

ITIH4 codifica a cadeia pesada H4 do inibidor inter-α-tripsina (ITI-H4), uma glicoproteína secretada enriquecida no fígado que se associa à família dos inibidores inter-α e contribui para a organização da matriz extracelular e para a modulação da atividade de proteases na circulação. A ITI-H4 está ligada à biologia inflamatória e de fase aguda, com sua regulação influenciada por vias dependentes de citocinas que remodelam a composição das proteínas plasmáticas durante lesão tecidual e respostas imunes. Alterações na expressão e no processamento de ITIH4 foram relatadas em múltiplos contextos de doença, incluindo distúrbios inflamatórios e assinaturas proteômicas associadas ao câncer, sustentando seu uso como um alvo de pesquisa mecanístico e adjacente a biomarcadores. Como um fator solúvel que impacta o meio extracelular e as interações célula–matriz, ITIH4 é relevante para o estudo de vias que governam inflamação, remodelamento tecidual e regulação do microambiente.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ITI-H4 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ITIH4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ITIH4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ITIH4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ITI-H4.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ITIH4 para a investigação da sinalização de ITI-H4, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ITIH4 críticos para a função ITI-H4
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ITIH4 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo ITI-H4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo ITI-H4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ITIH4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo ITI-H4 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR ITI-H4 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ITIH4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ITIH4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.