Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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IRSp53 Plasmide Double Nickase (h): sc-403072-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- IRSp53 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il IRSp53 Double Nickase Plasmid (h) e il IRSp53 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira BAIAP2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: IRSp53 Antibody (46): sc-136470
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
IRSp53 Plasmide Double Nickase (h) | sc-403072-NIC | 20 µg | $410.00 |
BAIAP2 codifica IRSp53, un adattatore contenente un dominio I-BAR che collega la percezione della curvatura di membrana al rimodellamento del citoscheletro di actina, coordinando la segnalazione delle GTPasi della famiglia Rho e regolatori dell’actina come WAVE e Mena/VASP. IRSp53 supporta la formazione di filopodi e lamellipodi, l’endocitosi e vie dipendenti dai fattori di crescita che controllano la migrazione cellulare, l’adesione e la crescita dei neuriti. Per queste funzioni, BAIAP2 è comunemente studiato in contesti in cui la dinamica del citoscheletro e il traffico di membrana modellano il comportamento cellulare, inclusi processi di neurosviluppo e sinaptici. La disregolazione delle reti associate a IRSp53 è stata studiata in relazione a fenotipi di motilità e invasione cellulare alterati, nonché alla biologia delle malattie neurologiche.
IRSp53 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus BAIAP2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di BAIAP2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di BAIAP2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con BAIAP2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.