Integrin αX/ITGAX/CD11c Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401765-NIC

ITGAX codifica a integrina αX (CD11c), que forma um heterodímero com a integrina β2 (CD18) para constituir o recetor do complemento 4 (CR4), um recetor-chave de adesão e reconhecimento em células dendríticas, monócitos, macrófagos e em subpopulações de neutrófilos. O CD11c medeia a adesão, migração e fagocitose de leucócitos ao ligar-se a ligandos como partículas opsonizadas por iC3b e fibrinogénio, coordenando a sinalização “outside-in”, que se articula com a remodelação do citoesqueleto e com programas transcricionais inflamatórios. Através de sinalização dependente de integrinas e de “crosstalk” com recetores da imunidade inata, o ITGAX contribui para a captação de antigénios, interações célula–célula e para a modelação de respostas imunitárias adaptativas. Alterações na expressão e função do CD11c são estudadas em contextos como inflamação crónica, autoimunidade, biologia mieloide associada a tumores e vigilância imunitária tecidular desregulada.

Integrin αX/ITGAX/CD11c O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ITGAX em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ITGAX. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ITGAX. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ITGAX interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.