Integrin αV/ITGAV/CD51 Plasmide Double Nickase (m): sc-421169-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Integrin αV/ITGAV/CD51 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Integrin αV/ITGAV/CD51 Double Nickase Plasmid (m) e il Integrin αV/ITGAV/CD51 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Itgav. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Integrin αV/ITGAV/CD51 Antibody (H-2): sc-376156
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Integrin αV/ITGAV/CD51 Plasmide Double Nickase (m) | sc-421169-NIC | 20 µg | $410.00 |
Itgav codifica l’integrina αV (ITGAV/CD51), una subunità α che si associa a diverse integrine β per formare recettori per ligandi della matrice extracellulare contenenti motivi RGD, tra cui vitronectina, fibronectina e osteopontina. Attraverso l’assemblaggio delle adesioni focali e il crosstalk con la segnalazione FAK/Src, PI3K–AKT e MAPK, l’integrina αV regola l’adesione, la migrazione e la sopravvivenza cellulare, oltre alla meccanotrasduzione, e può modulare l’attivazione del TGF-β latente in microambienti ricchi di matrice. Nei tessuti murini, ITGAV contribuisce all’angiogenesi, al traffico delle cellule immunitarie, alla riparazione delle ferite e alla funzione degli osteoclasti, collegando il rimodellamento della matrice extracellulare alle decisioni di stato cellulare. La deregolazione della segnalazione delle integrine contenenti αV è ampiamente studiata nella fibrosi, nell’infiammazione e nelle interazioni stromali associate ai tumori, dove alterazioni dell’adesione e della segnalazione mediata dalla matrice possono favorire fenotipi invasivi e pro-sopravvivenza.
Integrin αV/ITGAV/CD51 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Itgav nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Itgav. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Itgav. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Itgav interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.