Integrin αE/ITGAE/CD103 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-404333

Panoramica

ITGAE codifica l’integrina αE (CD103), che eterodimerizza con l’integrina β7 formando αEβ7, un recettore di adesione che si lega alla E-caderina e favorisce la ritenzione dei linfociti nei tessuti epiteliali. Questa integrina contribuisce al traffico delle cellule immunitarie, alla residenza tissutale e all’organizzazione della sinapsi immunologica, integrando segnali della matrice extracellulare e dell’adesione cellula-cellula con il rimodellamento del citoscheletro e vie di segnalazione “outside-in” che influenzano lo stato di attivazione. CD103 è ampiamente utilizzato come marcatore delle cellule T della memoria residenti nei tessuti e di sottopopolazioni di cellule dendritiche, e la sua funzione interseca vie che regolano l’immunità della barriera epiteliale e la sorveglianza mucosale. Interazioni mediate da αEβ7 deregolate sono state associate a processi infiammatori e autoimmuni nei tessuti di barriera e alla composizione del microambiente immunitario tumorale, rendendo ITGAE un bersaglio rilevante per studi meccanicistici sull’infiltrazione immunitaria e sul crosstalk epitelio–immunitario.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Integrin αE/ITGAE/CD103 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene ITGAE in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del ITGAE insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto ITGAE a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Integrin αE/ITGAE/CD103.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di ITGAE per lo studio della segnalazione di Integrin αE/ITGAE/CD103, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni ITGAE critici per la funzione di Integrin αE/ITGAE/CD103
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di ITGAE per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal Integrin αE/ITGAE/CD103 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal Integrin αE/ITGAE/CD103 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus ITGAE. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal Integrin αE/ITGAE/CD103 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR Integrin αE/ITGAE/CD103 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia ITGAE per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio ITGAE definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.