Integrin αE/ITGAE/CD103 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-404333

概要

ITGAEはインテグリンαE（CD103）をコードしており、インテグリンβ7とヘテロ二量体を形成してαEβ7となります。αEβ7はE-カドヘリンに結合する接着受容体で、リンパ球が上皮組織内に保持されるのを助けます。このインテグリンは免疫細胞のトラフィッキング、組織常在化、ならびに免疫シナプスの構築に関与し、細胞外マトリックスや細胞間接着からの情報を、細胞骨格の再編成や活性化状態に影響するアウトサイドインシグナル伝達経路と統合します。CD103は、組織常在性メモリーT細胞および一部の樹状細胞サブセットのマーカーとして広く用いられており、その機能は上皮バリア免疫や粘膜監視を制御する経路とも交差します。αEβ7を介した相互作用の破綻は、バリア組織における炎症性・自己免疫性プロセスや、腫瘍免疫微小環境の構成と関連して報告されており、ITGAEは免疫浸潤や上皮―免疫クロストークの機序解明に向けた研究標的として重要です。

Integrin αE/ITGAE/CD103 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるITGAE遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、ITGAE内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、ITGAEのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Integrin αE/ITGAE/CD103タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Integrin αE/ITGAE/CD103シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、ITGAE欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Integrin αE/ITGAE/CD103の機能に不可欠なITGAEエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ITGAEゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Integrin αE/ITGAE/CD103 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびIntegrin αE/ITGAE/CD103 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、ITGAE遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Integrin αE/ITGAE/CD103 HDRプラスミド（h）および Integrin αE/ITGAE/CD103 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはITGAEホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のITGAE標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。