Integrin α9/ITGA9 Plasmide Double Nickase (h): sc-402221-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Integrin α9/ITGA9 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Integrin α9/ITGA9 Double Nickase Plasmid (h) e il Integrin α9/ITGA9 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ITGA9. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Integrin α9/ITGA9 Plasmide Double Nickase (h) | sc-402221-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Integrin α9/ITGA9 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-402221-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
L’ITGA9 umano codifica l’integrina α9, una subunità α che eterodimerizza principalmente con β1 per formare un recettore di superficie cellulare che media l’adesione ai ligandi della matrice extracellulare e a segnali di guida. L’integrina α9/ITGA9 coordina la segnalazione outside-in e inside-out, influenzando il rimodellamento del citoscheletro, il turnover delle adesioni focali e la migrazione cellulare direzionale tramite vie che coinvolgono FAK/Src, PI3K–AKT e MAPK. Regolando le interazioni cellula–matrice, ITGA9 contribuisce a processi quali la motilità delle cellule epiteliali e mesenchimali, il rimodellamento tissutale e risposte associate al sistema linfatico e neurale. La deregolazione della segnalazione delle integrine e l’alterata espressione di ITGA9 sono state studiate in contesti che includono infiammazione, fibrosi e invasione e metastasi associate ai tumori, rendendolo rilevante per studi meccanicistici della segnalazione dipendente dall’adesione.
Integrin α9/ITGA9 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ITGA9 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ITGA9. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ITGA9. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ITGA9 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.