Integrin α7/ITGA7 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-421165

Panoramica

Itga7 codifica l’integrina α7 (ITGA7), una subunità α che eterodimerizza con l’integrina β1 per formare un recettore legante la laminina, arricchito nel muscolo scheletrico e cardiaco. Questo recettore di adesione collega la matrice extracellulare al citoscheletro di actina e contribuisce all’adesione, alla migrazione e alla differenziazione dei mioblasti, modulando al contempo la segnalazione attraverso complessi di adesione focale che coinvolgono FAK/Src, ILK e le vie a valle PI3K–AKT e MAPK. La meccanotrasduzione dipendente da ITGA7 sostiene la stabilità delle fibre muscolari e l’organizzazione della giunzione neuromuscolare, collegando i segnali di laminina extracellulari al rimodellamento del citoscheletro intracellulare. Alterazioni della funzione o dell’espressione di ITGA7 sono associate a una ridotta integrità muscolare e a fenotipi simili a distrofie in sistemi modello, rendendola un nodo utile per studiare lo sviluppo muscolare, la rigenerazione e la segnalazione della matrice extracellulare.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Integrin α7/ITGA7 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Itga7 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Itga7 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Itga7 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Integrin α7/ITGA7.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Itga7 per lo studio della segnalazione di Integrin α7/ITGA7, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Itga7 critici per la funzione di Integrin α7/ITGA7
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Itga7 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal Integrin α7/ITGA7 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal Integrin α7/ITGA7 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Itga7. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal Integrin α7/ITGA7 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR Integrin α7/ITGA7 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Itga7 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Itga7 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.