Integrin α3/ITGA3/CD49c Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m2): sc-421161-KO-2

Panoramica

Itga3 codifica l’integrina α3 (ITGA3/CD49c), una subunità α che si associa alla β1 formando l’integrina α3β1, in grado di legare la laminina e fondamentale per l’adesione tra cellula e matrice extracellulare. Attraverso la segnalazione delle adesioni focali, ITGA3 influenza l’organizzazione del citoscheletro e attiva vie a valle come FAK/Src, PI3K–AKT e MAPK, regolando migrazione, sopravvivenza e morfogenesi epiteliale. Nei tessuti murini, l’integrina α3 contribuisce alle interazioni con la membrana basale e all’architettura della barriera epiteliale, collegandosi a processi quali il rimodellamento associato alle ferite e la polarità cellulare. Alterazioni della segnalazione mediata da ITGA3/integrine sono spesso studiate in contesti di comportamento invasivo, rimodellamento tissutale associato all’infiammazione e fenotipi dello sviluppo degli organi.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Integrin α3/ITGA3/CD49c (m2) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Itga3 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Itga3 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Itga3 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Integrin α3/ITGA3/CD49c.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Itga3 per lo studio della segnalazione di Integrin α3/ITGA3/CD49c, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Itga3 critici per la funzione di Integrin α3/ITGA3/CD49c
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Itga3 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal Integrin α3/ITGA3/CD49c CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal Integrin α3/ITGA3/CD49c CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Itga3. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal Integrin α3/ITGA3/CD49c Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR Integrin α3/ITGA3/CD49c (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Itga3 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Itga3 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.