Integrin β1/ITGB1 Plasmide Double Nickase (h): sc-400097-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Integrin β1/ITGB1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Integrin β1/ITGB1 Double Nickase Plasmid (h) e il Integrin β1/ITGB1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ITGB1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Integrin β1/ITGB1 Antibody (A-4): sc-374429
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Integrin β1/ITGB1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-400097-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Integrin β1/ITGB1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400097-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ITGB1 codifica l’integrina β1, una subunità fondamentale che forma eterodimeri con molte integrine α per mediare l’adesione cellula–matrice extracellulare e la meccanotrasduzione. Attraverso l’accoppiamento con la focal adhesion kinase (FAK), le chinasi della famiglia SRC, PI3K–AKT e la segnalazione MAPK, l’integrina β1 regola l’organizzazione del citoscheletro, la polarità, la sopravvivenza e la migrazione. Le interazioni dipendenti da ITGB1 con laminine, collagene e fibronectina influenzano l’integrità epiteliale, il traffico delle cellule immunitarie e il comportamento delle nicchie delle cellule staminali. La deregolazione della segnalazione e del traffico di ITGB1 è spesso studiata nei contesti di invasione e metastasi tumorale, fibrosi e rimodellamento tissutale infiammatorio.
Integrin β1/ITGB1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ITGB1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ITGB1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ITGB1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ITGB1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.