Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
IMP-1/IGF2BP1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-431212
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- IMP-1/IGF2BP1 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico IMP-1/IGF2BP1, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: IMP-1/IGF2BP1 Antibody (D-9): sc-166344
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
IMP-1/IGF2BP1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m) | sc-431212 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
Igf2bp1 codifica la proteina legante l’RNA IMP-1/IGF2BP1, un regolatore post-trascrizionale che riconosce gli mRNA bersaglio tramite domini KH e ne modula la localizzazione, la stabilità e la traduzione. Nelle cellule di topo, IGF2BP1 contribuisce a coordinare programmi legati alla crescita e alla differenziazione plasmando il destino degli mRNA all’interno di granuli ribonucleoproteici e lungo vie di trasporto associate al citoscheletro. La sua rete regolatoria interseca assi di segnalazione proliferativi e dello sviluppo ed è spesso studiata per gli effetti sulle transizioni di stato cellulare, sulla localizzazione dell’RNA associata alla migrazione e sul controllo della traduzione. Programmi di RNA associati a IGF2BP1 deregolati sono stati implicati in fenotipi oncogenici e in un’alterata omeostasi tissutale, rendendola rilevante per studi meccanicistici della regolazione dell’espressione genica in modelli pertinenti alla malattia.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO IMP-1/IGF2BP1 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Igf2bp1 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Igf2bp1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Igf2bp1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina IMP-1/IGF2BP1.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Igf2bp1 per lo studio della segnalazione di IMP-1/IGF2BP1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni Igf2bp1 critici per la funzione di IMP-1/IGF2BP1
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Igf2bp1 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal IMP-1/IGF2BP1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal IMP-1/IGF2BP1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Igf2bp1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal IMP-1/IGF2BP1 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR IMP-1/IGF2BP1 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Igf2bp1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Igf2bp1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.