IL-9 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-421119

Panoramica

Il gene murino Il9 codifica l’interleuchina-9 (IL-9), una citochina pleiotropica prodotta prevalentemente dalle cellule Th9 che modula la proliferazione, la differenziazione e la sopravvivenza delle cellule immunitarie. L’IL-9 segnala attraverso il complesso recettoriale dell’IL-9 attivando le vie JAK/STAT, con programmi trascrizionali soprattutto dipendenti da STAT5 che modellano le reti citochiniche e l’infiammazione tissutale. Nei sistemi murini, l’IL-9 influenza la biologia dei mastociti e degli eosinofili, le risposte della barriera mucosale e il rimodellamento immunitario delle vie aeree, collegandola all’infiammazione allergica e alla disregolazione immunitaria. Un’attività alterata dell’IL-9 è spesso studiata in modelli di infiammazione delle vie aeree tipo asma, di immunità indotta da elminti e di microambienti immunitari associati ai tumori.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO IL-9 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Il9 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Il9 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Il9 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina IL-9.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Il9 per lo studio della segnalazione di IL-9, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Il9 critici per la funzione di IL-9
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Il9 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal IL-9 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal IL-9 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Il9. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal IL-9 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR IL-9 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Il9 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Il9 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.