IL-33 Plasmide Double Nickase (h): sc-417699-NIC

Il gene umano **IL33** codifica **IL-33**, una citochina associata al nucleo appartenente alla famiglia dell’IL-1, che viene rilasciata in seguito a stress o danno cellulare e agisce come *alarmina* nel modulare l’immunità innata e adattativa. L’IL-33 extracellulare segnala principalmente attraverso il complesso recettoriale **ST2/IL1RL1–IL-1RAcP**, attivando vie dipendenti da **MyD88**, incluse le cascate **NF-κB** e **MAPK**, promuovendo programmi infiammatori di tipo 2 e il rimodellamento tissutale. L’attività di IL-33 influenza il dialogo tra epitelio e stroma e tra le cellule immunitarie nei siti di barriera, modulando le risposte di eosinofili, mastociti, basofili e **ILC2**. Una disregolazione della segnalazione di **IL33** è stata implicata nell’asma e nell’infiammazione allergica, nonché in processi infiammatori e fibrotici in molteplici sistemi d’organo, rendendolo un nodo rilevante per studi meccanicistici dell’immunopatologia.

IL-33 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus IL33 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di IL33. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di IL33. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con IL33 interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.