IL-28A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405375
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IL-28A O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico IL-28A, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IL-28A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405375 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
IFNL2 codifica o interferon lambda 2 (IL-28A), um interferon do tipo III que sinaliza por meio do complexo receptor IFNLR1/IL10RB para ativar as vias JAK–STAT e induzir genes estimulados por interferon. Essa citocina sustenta a defesa antiviral de epitélios e mucosas e modula respostas imunes inatas e adaptativas ao moldar a produção de quimiocinas e a apresentação de antígenos. A atividade de IL-28A se cruza com a sinalização de receptores de reconhecimento de padrões, incluindo vias de TLR e de receptores do tipo RIG-I, para coordenar programas transcricionais antivirais. A desregulação da sinalização de IFNL2 e variações genéticas têm sido associadas a desfechos diferentes em infecções virais e processos inflamatórios, o que a torna um alvo útil para estudos mecanísticos de interações hospedeiro–patógeno e de regulação imune.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO IL-28A (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene IFNL2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do IFNL2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do IFNL2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína IL-28A.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de IFNL2 para a investigação da sinalização de IL-28A, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) IFNL2 críticos para a função IL-28A
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos IFNL2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo IL-28A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo IL-28A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus IFNL2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo IL-28A Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR IL-28A (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia IFNL2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo IFNL2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.