Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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IL-15Rα Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421090
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- IL-15Rα El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico IL-15Rα, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: IL-15Rα Anticuerpo (G-3): sc-374023
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
IL-15Rα Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421090 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Il15ra codifica la subunidad alfa del receptor de interleucina-15 del ratón (IL-15Rα), un componente de unión de alta afinidad que presenta la IL-15 en trans a IL-2/15Rβ y a la cadena γ común en linfocitos vecinos. Este complejo receptor acopla la detección de citocinas con la señalización JAK/STAT y sostiene programas posteriores que regulan la proliferación, la supervivencia y la diferenciación de las células NK y de los linfocitos T CD8+ con fenotipo de memoria. IL-15Rα también contribuye a la homeostasis inmunitaria al modular las respuestas inflamatorias y el tráfico de leucocitos, con implicaciones en modelos de autoinmunidad, inflamación crónica, infección e inmunología tumoral. Por lo tanto, la alteración genética de Il15ra es útil para desentrañar la comunicación dependiente de citocinas entre las células presentadoras de antígeno y los subgrupos de linfocitos respondedores.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO IL-15Rα (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Il15ra en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Il15ra junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Il15ra tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína IL-15Rα.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Il15ra para la investigación de la señalización de IL-15Rα, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Il15ra críticos para la función de IL-15Rα
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Il15ra para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido IL-15Rα CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido IL-15Rα CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Il15ra. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR IL-15Rα (m) y el plásmido HDR IL-15Rα (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Il15ra para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Il15ra definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.