IL-13Rα2 Plasmide di attivazione CRISPR (h): sc-402525-ACT
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- IL-13Rα2 Plasmide di attivazione CRISPR (h) è un mediatore sinergico di attivazione (SAM) del sistema di attivazione trascrizionale disegnato per upregolare specificatamente l'espressione genica
- IL-13Rα2 CRISPR Activation Plasmid (h) consiste di tre plasmidi in proporzione 1:1:1 : un plasmide che codifica la nucleasi (D10A and N863A) Cas9 (dCas9) deattivata fusa al dominio di transattivazione VP64, ed un gene di resistenza alla blasticina; un plasmide che codifica per la proteina di fusione MS2-p65-HSF1, ed un gene di resistenza all'igromicina;un plasmide che codifica un RNA guida di 20 nt target specifico, e un gene di resistenza alla puromicina.
- Il complesso SAM legae una regione sito-specifica circa 200-250 nt a monte del sito di start trascrizionale e fornisce un robusto reclutamento di fattori trascrizionali per un'attivazione altamente efficiente del gene target
- I gRNA codificati dal IL-13Rα2 CRISPR Activation Plasmid (h) e dal IL-13Rα2 CRISPR Activation Plasmid (h2) prendono di mira regioni regolatorie distinte a monte del sito di inizio della trascrizione di IL13RA2. Uno o entrambi i modelli potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: IL-13Rα2 Antibody (2K8): sc-134363
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
IL-13Rα2 Plasmide di attivazione CRISPR (h) | sc-402525-ACT | 20 µg | $397.00 | |||
IL-13Rα2 Plasmide di attivazione CRISPR (h2) | sc-402525-ACT-2 | 20 µg | $397.00 |
IL13RA2 umano codifica per il recettore dell’interleuchina-13 alfa 2 (IL-13Rα2), una subunità di legame per IL-13 ad alta affinità che modula la segnalazione delle citochine di tipo 2 sulla superficie cellulare. Modellando le risposte guidate da IL-13 e la dinamica dei complessi recettoriali, IL-13Rα2 influenza programmi a valle associati alla segnalazione infiammatoria e alle transizioni dello stato cellulare, incluse vie che, a seconda del contesto cellulare, intersecano output trascrizionali associati a JAK/STAT e MAPK. L’espressione di IL13RA2 è spesso utilizzata come marcatore di una responsività alle citochine alterata ed è stata associata alla biologia tumorale, alle interazioni con il microambiente immunitario e a processi neuroinfiammatori. Queste proprietà rendono IL-13Rα2 un bersaglio utile per studi meccanicistici sulla regolazione dei recettori per citochine, sul sequestro del ligando e sul riorientamento della segnalazione in modelli rilevanti per la malattia.
IL-13Rα2 Il plasmide di attivazione CRISPR (h) fornisce un approccio mirato e non distruttivo per sovraregolare l'espressione endogena di IL13RA2 senza alterare la sequenza di DNA sottostante.
IL-13Rα2 Il plasmide di attivazione CRISPR (h) è un sistema SAM (mediatore di attivazione sinergico) a tre plasmidi progettato per la sovraregolazione trascrizionale altamente efficiente e sito-specifica del locus IL13RA2 nelle linee cellulari umane. Il sistema è costruito attorno a una Cas9 cataliticamente inattiva (dCas9) che porta due mutazioni inattivanti (D10A e N863A) che eliminano l'attività nucleasica preservando al contempo il legame con il DNA. Questa dCas9 è fusa con VP64, un potente attivatore trascrizionale, ed è coespressa con un gene di resistenza alla blasticidina per la selezione. Il secondo plasmide codifica la proteina di fusione MS2-p65-HSF1, un complesso attivatore secondario che agisce in sinergia con dCas9-VP64, insieme a un gene di resistenza all'igromicina. Il terzo plasmide codifica un sgRNA specifico per il bersaglio di 20 nt fuso a due aptameri di RNA MS2 che reclutano il complesso MS2-p65-HSF1 nel sito di attivazione, accompagnato da un gene di resistenza alla puromicina. I tre plasmidi vengono somministrati in un rapporto di massa 1:1:1 per un'espressione bilanciata di tutti i componenti del sistema.
Una volta assemblato nel locus bersaglio, il complesso SAM si lega a circa 200 bp a monte del sito di inizio della trascrizione IL13RA2, dove VP64, p65 e HSF1 agiscono in modo concertato per reclutare il machinery trascrizionale e guidare la sovraregolazione dell'espressione endogena di IL-13Rα2. A differenza della Cas9 con attività nucleasica, dCas9 non introduce rotture a doppio filamento né modifica la sequenza genomica, preservando il locus IL13RA2 nativo e consentendo lo studio delle risposte trascrizionali dipendenti da IL-13Rα2 nel locus endogeno, rendendolo uno strumento prezioso per studi funzionali, l'identificazione di geni bersaglio e la modellizzazione del ripristino della via IL-13Rα2 nelle cellule tumorali con espressione di IL13RA2 silenziata o ridotta.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.