IL-11Rα Plasmide Double Nickase (h): sc-402503-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- IL-11Rα Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il IL-11Rα Double Nickase Plasmid (h) e il IL-11Rα Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira IL11RA. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: IL-11Rα Antibody (4D12): sc-130920
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
IL-11Rα Plasmide Double Nickase (h) | sc-402503-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IL-11Rα Plasmide Double Nickase (h2) | sc-402503-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
IL11RA codifica il recettore umano dell’interleuchina-11 alfa (IL-11Rα), una componente di legame per il ligando che si associa al co-recettore GP130 per avviare la segnalazione dipendente da IL-11. Dopo il legame con la citochina, questo complesso recettoriale attiva JAK/STAT3 e anche le vie associate a MAPK/ERK e PI3K, che regolano programmi di sopravvivenza cellulare, differenziamento e rimodellamento tissutale. IL-11Rα è studiato nella comunicazione tra stroma ed epitelio e in contesti in cui una segnalazione citochinica aberrante contribuisce a fenotipi infiammatori e fibrotici. Un’attività deregolata della via IL11RA è stata inoltre collegata ad alterazioni dello sviluppo osseo e cranio-facciale, a supporto della sua rilevanza nella biologia dello sviluppo e nella ricerca di modellizzazione delle malattie.
IL-11Rα Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus IL11RA nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di IL11RA. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di IL11RA. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con IL11RA interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.