IFI-35 Plasmide Double Nickase (h): sc-406072-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- IFI-35 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il IFI-35 Double Nickase Plasmid (h) e il IFI-35 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira IFI35. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: IFI-35 Antibody (B-1): sc-393513
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
IFI-35 Plasmide Double Nickase (h) | sc-406072-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IFI-35 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-406072-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
IFI35 codifica IFI-35, una proteina inducibile dall’interferone contenente un motivo “leucine zipper”, che forma complessi funzionali con NMI e contribuisce ai programmi di espressione genica guidati dall’interferone di tipo I. IFI-35 è associata alla segnalazione dell’immunità innata e a risposte trascrizionali infiammatorie a valle delle vie stimolate dall’interferone, influenzando processi regolati dalle citochine e risposte cellulari allo stress. Un’alterata espressione di IFI35 è stata riportata in contesti di infezione virale, condizioni autoimmuni e infiammatorie, e firme immuno-correlate osservate in molteplici tumori, rendendola un nodo utile per analizzare fenotipi associati all’interferone. Lo studio di IFI-35 supporta ricerche meccanicistiche sulle interazioni ospite–patogeno, sugli stati di attivazione immunitaria e sul crosstalk tra vie di segnalazione che modella l’omeostasi cellulare.
IFI-35 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus IFI35 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di IFI35. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di IFI35. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con IFI35 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.