IFI-204 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421033
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IFI-204 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico IFI-204, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IFI-204 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421033 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene murino Ifi204 codifica a IFI-204, um membro da família de proteínas PYHIN induzível por interferon, implicado na vigilância imune inata e na regulação da expressão de genes inflamatórios. A IFI-204 está associada a programas de detecção de ácidos nucleicos no núcleo e no citosol que convergem para a sinalização de interferon tipo I, respostas transcricionais ligadas ao NF-κB e pontos de controle do ciclo celular. Por meio dessas vias, o Ifi204 tem sido estudado em contextos de restrição antiviral, ativação de macrófagos e células dendríticas e modulação de estados proliferativos versus senescentes. Assim, a atividade desregulada da IFI-204 é relevante para modelos experimentais de inflamação crônica, fenótipos semelhantes aos de autoimunidade, patologia impulsionada por infecção e interações entre tumor e sistema imune, sem implicar desfecho clínico.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO IFI-204 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Ifi204 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Ifi204, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Ifi204 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína IFI-204.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Ifi204 para a investigação da sinalização de IFI-204, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Ifi204 críticos para a função IFI-204
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Ifi204 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo IFI-204 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo IFI-204 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Ifi204. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo IFI-204 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR IFI-204 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Ifi204 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Ifi204 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.